Teste de alergologie in vitroTeste de alergologie in vitro
Descriere
Diagnosticul bolilor alergice este un proces complex la care contribuie anamneza, examenul fizic, metodele de testare in vivo si in vitro. Reactiile alergice se pot manifesta in diverse organe si la grupe de varsta diferite. Termenul de “alergie” este larg utilizat in lumea medicala si non-medicala, adesea in mod nejustificat. Demonstrarea implicarii mecanismelor imunologice este esentiala pentru a considera manifestarile pacientului ca fiind de natura alergica si a le diferentia de alte reactii adverse la alimente si medicamente la care mecanismele imunologice nu pot fi dovedite. Prezentam in continuare cateva definitii ale termenilor si notiunilor de baza in alergologie: Atopie – tendinta personala sau familiala de a produce anticorpi IgE ca raspuns la cantitati mici de alergeni, de obicei proteine, si de a dezvolta simptome tipice de astm, rinoconjunctivita sau eczema/dermatita. Termenul de “atopie” descrie aceasta predispozitie clinica si nu trebuie folosit pentru a descrie boli. Alergie – o reactie de hipersensibilitate initiata prin mecanisme imunologice. La majoritatea pacientilor anticorpii responsabili de manifestarile alergice sunt de tip IgE, de aceea, in aceste cazuri, este vorba de o alergie mediata IgE. Mai exista si un alt tip de alergie: alergia mediata non-IgE. In acest tip de alergie sunt incluse boala serului, alveolita alergica (afectiuni mediate IgG), dermatita de contact (alergie mediata celular prin limfocitele T) etc. Hipersensibilitatea determina simptome sau semne reproductibile in mod obiectiv, initiate de expunerea la un stimul definit, prezent intr-o cantitate tolerata de subiectii normali. Termenul de “hipersensibilitate” este folosit ca un fel de “umbrela” pentru a include pe langa reactiile alergice si alte manifestari la care nu s-a dovedit a fi implicat un mecanism imunologic, cum este cazul hipersensibilitatii la aspirina. Definitia de mai sus nu include raspunsurile clasice la infectie, autoimunitate sau reactiile toxice. Termenul de “pseudoalergie” trebuie abandonat. Revenind la atopie, aceasta este o conditie mostenita. De exemplu, riscul unui copil de a dezvolta o alergie mediata IgE este de 40-60% daca ambii parinti sunt atopici. La copiii cu predispozitie mare, sensibilizarea IgE si afectiunile atopice se instaleaza precoce in cursul vietii. Fenotipul alergic se exprima variat in diferite perioade ale vietii. Astfel, alergiile alimentare joaca un rol predominant in primii ani de viata. Manifestarile clinice sunt reprezentate in special de dermatita atopica si simptomele gastrointestinale. Pe masura ce prevalenta alergiilor alimentare scade cu varsta, creste semnificatia alergenilor inhalanti, cu instalarea simptomatologiilor de tract respirator superior si inferior. In multe cazuri rinita alergica poate fi considerata un precursor al astmului bronsic. Unele persoane care nu pot fi incadrate ca fiind “atopice” scapa sensibilizarii la alergeni obisnuiti in copilarie si adolescenta, dar dezvolta o alergie mediata IgE mai tarziu, atunci cand sunt expuse la doze mari de alergeni, adesea in prezenta unor adjuvanti cum ar fi fumul de tigara. Aceasta situatie este intalnita cel mai adesea in cazul alergiilor profesionale. In cazul alergiilor la venin de insecte si la unele medicamente sunt implicate tot mecanisme mediate IgE, dar sunt afectate in aceeasi masura si persoanele atopice si cele non-atopice. In cele ce urmeaza ne vom referi numai la alergia mediata IgE, deoarece testele de laborator au rolul de a evidentia IgE alergen-specifice. Aparitia bolilor sau sindroamelor alergice solicita interventia, pe de o parte a subiectilor “predispusi” (“atopici” in general), iar pe de alta parte a unor factori de mediu extern – aproape totdeauna – denumiti alergeni. Alergeni au fost denumite antigenele care provoaca simptome alergice. Dupa calea de patrundere, alergenii pot fi clasificati in: 1. Pneumalergeni (polen, praf de casa, fungi atmosferici, peri si epiderme de animale); 2. Alergeni alimentari si digestivi (albus de ou, lapte de vaca, capsuni, fragi etc.); 3. Alergeni de insecte (veninuri de insecte); 4. Alergeni medicamentosi; 5. Alergeni chimici (profesionali sau nu). Pneumalergenii - sunt reprezentati de: A. Polenul atmosferic; B. Fungii alergogeni atmosferici; C. Praful de casa; D. Peri si epiderme de animale. A. Polenul atmosferic este alergenul atopic raspandit in toata zona temperata, raspunzator, in functie de tara si localitati, de un numar relativ mare de rinite intermitente, rino-conjunctivite si astm bronsic. In mod obisnuit plantele cu polen alergogen se impart in: graminee, ierburi, arbori. Gramineele cuprind circa 9000 de specii. Exista variatii mari in lume in ceea ce priveste polenizarea lor. In Europa aceasta perioada cuprinde lunile mai-iulie. Cynodon dactylon, Lolium perenae, Sorghum halepense, Bromus inermis, Holcus lanata, Phleum pratense, Triticum sativum, Festuca elation sunt cele mai importante plante polenic alergogene in tara noastra si in Europa temperata. Polenul de ierburi este al doilea in ceea ce priveste sensibilizarea polinica la noi in tara. Sensibilizarile cele mai numeroase si mai severe apar la polenul de Ambrosia (Ambrosia artemisitolia, psilostachya, trifida). In Romania aceste plante cresc pe Valea Muresului, infloresc vara tarziu si toamna devreme, iar epidemiile de astm bronsic (sever) apar toamna tarziu. O oarecare importanta prezinta polenul de Artemisia absinthium, Artemisia vulgaris (pelin negru) si Crysantemum care apare in tara noastra mai ales la mijlocul si sfarsitul verii. In Romania, polenul de arbori este dominant in lunile martie-mai si apoi iunie. Arborii, din punct de vedere alergologic, reunesc familia Fagale, cu subdiviziunile ei. (ex.: Betulacee, Fagacee, Ulmacee, Platunacee, Oleacee, etc). Desi polenul de arbori este putin alergizant, in unele zone sensibilizarea poate fi importanta. B. Fungii atmosferici sunt raspanditi pe tot globul, dar incidenta speciilor este diferita in functie de continent sau regiune si, mai ales, de anotimpul in care s-a facut cercetarea, stiut fiind ca acestia se reduc in lunile de iarna pana aproape de zero. Temperatura medie, curentii de aer, precipitatiile si, mai ales, substratul util hranei lor influenteaza decisiv prezenta si inmultirea lor. In tara noastra fungul dominant este Cladosporium care insa este putin alergizant, la fel ca si Penicillium spp. Alternaria spp. produce sensibilizari respiratorii rare, in timp ce Aspergillus spp. este considerat a fi fungul cel mai important in aparitia accidentelor alergice respiratorii. C. Praful de casa este considerat pentru multe tari (inclusiv Romania) ca principalul alergen sensibilizant respirator atat pentru rinita persistenta cat si pentru astmul bronsic. El este de asemenea incriminat a fi agentul etiopatologic pentru unele dermatite alergice. Praful nu este in sine un alergen ci un amestec de alergeni. Compozitia sa difera de la o casa la alta si de la un loc la altul. Acarienii, perii si epidermele de animale, resturile de insecte si fungi, plus resturile de diverse vegetale constituie, in ordinea de mai sus a importantei, multitudinea compozitiei alergenice a prafului de casa. Principalul alergen din praful de casa este acarianul Dermatophagoides pteronyssinus, acesta fiind si primul identificat. Ulterior s-a descoperit si al doilea acarian, Dermatophagoides farinae. Acarienii se gasesc in scuamele umane. Un gram de praf de casa poate contine sute si chiar mii din acesti alergeni, mai ales in lunile februarie-martie si septembrie-noiembrie. Sensibilizarea la alergenul provenit din gandacul de bucatarie, in praful de casa sau ca alergen separat, a fost raportata relativ frecvent in ultimii ani; pot fi infectate bucatariile, aparatura pentru incalzit apa si sistemele centrale de incalzire, aparatele de radio si televiziune, ca si frigiderele deschise. La subiectii sensibilizati, alergizarea duce la aparitia astmului bronsic sau a rinitei persistente ca alergen inhalant, dar este incriminat a avea un rol si ca alergen ingestant. Insectele respective fac parte din familia Blatidelor si sunt ubicuitare. Sunt cunoscute mai ales: Blatella germanica, Blatta orientalis, Periplaneta Americana ca si Blatta africana. D. In afara componentelor alergenice din praful de casa, care provin din peri si epiderme de animale, acestea pot reprezenta uneori alergeni de sine statatori, extrem de puternici. Alergenul “par de pisica” este un alergen puternic si raspandit in masura in care pisica este un oaspete obisnuit in casele noastre, cu copii sau fara. Antigenul este o glicoproteina, continut in principal in saliva, dar existand in cantitate importanta si in extractele de par, ca rezultat al “spalarii” lor prin saliva proprie. Sensibilizarea umana se manifesta sub forma de rinita persistenta sau astm bronsic, uneori sever. Alergenul “par de caine” are putere sensibilizanta relativ mica, desi cainii reprezinta populatia de animale domestice cea mai mare. Alergenii sunt continuti in scuame, dar se pot gasi si in urina, ser sau saliva. Nu a fost identificat un alergen major, dar cel din scuame este mai important. Reactiile alergice la cobai au fost descrise atat la personalul de laborator cat si in mediul domestic, datorita popularitatii din ce in ce mai mari a cobailor ca animale de companie. Sursele de alergeni sunt reprezentate de par, urina, saliva si epitelii. Persoanele sensibilizate pot dezvolta astm, rino-conjunctivita si dermatita atopica. Simptome clinice similare pot fi generate si de expunerea la epiteliile de hamster. 2. Alergenii alimentari Se apreciaza ca incidenta alergiilor alimentare la copilul mic este in proportie de 0.5-6%. Trebuie diferentiate alergiile alimentare propriu-zise de hipersensibilizarile non-alergice care sunt de asemenea frecvente. De aceea este importanta cercetarea alergenilor alimentari. Principalele alimente alergizante sunt: laptele de vaca, ouale de pasare, pestele, apoi carnea, nucile, fragii-capsunile, soia, arahidele, midii, scoici, crustacei, legume, fructe si sucuri de fructe. Destul de frecvent alergenii alimentari dau reactii incrucisate: - cu alte alimente din aceeasi familie (ex.: graul cu secara sau nucile si alunele cu alte categorii de alergeni alimentari); - cu alte categorii de alergeni alimentari: frecventa asociere a alergiei la unele fructe (mar, alune) si unele legume (telina si morcov); - cu alti alergeni (polenuri); de exemplu, polenul de mesteacan reactioneaza cu alunele sau murele si cu telina cruda. Astfel, ingestia de alune la un pacient cu rinita alergica la polen de mesteacan poate declansa un puseu de prurit faringian, insotit de salve de stranuturi si rinoree. Pe primul loc la noi in tara se afla sensibilizarea la laptele de vaca, urmata de sensibilizarea la alergenii din ou. Laptele de vaca contine 3 alergeni, alergenul major fiind beta-lactoglobulina, celelalte doua fiind alfa-lactalbumina si cazeina. Alergenul major produce sindroame clinice la copilul mic, dar nu si la adult. Alergenii majori din ou sunt ovalbuminele si ovomucoidul care sunt continuti in albusul de ou si care sunt sensibilizanti atat pentru copil, cat si pentru adult. Pestele contine fractiuni alergizante extrem de numeroase, majoritatea fiind termolabile. Alergenul M provenit de la cod a fost primul alergen izolat ca fractiune pura. Pacientii cu alergie la peste prezinta adesea simptome dramatice, cum ar fi crize severe de astm sau reactii anafilactice. Reactiile sistemice sunt induse adesea nu numai de ingestia de peste ci si de inhalarea aburilor care rezulta din prelucrarea termica a acestuia. Carnea, in special cea de porc, contine proteine alergenice, inclusiv gelatina, care dau frecvent reactii alergice. Glutenul, proteina elastica din grau, secara si orz, intalnit in industria biscuitilor, prajiturilor si pastelor, este implicat in principal in patogenia bolii celiace (afectiune ereditara a sistemului imun, in care ingestia de gluten provoaca afectarea mucoasei intestinului subtire, avand drept consecinta malabsorbtia substantelor nutritive). Boala celiaca (denumita si intoleranta la gluten), cauzata de anticorpi IgA si IgG fata de gluten (gliadina) trebuie diferentiata de alergia la proteinele din cereale (printre care se numara si glutenul), care este mediata prin anticorpi IgE si care se caracterizeaza clinic prin manifestari de tip imediat (cutanate, digestive sau respiratorii). Legumele si fructele prezinta importanta in alergiile alimentare la copii mari si adulti. Sunt implicate in special in sindromul alergiei orale – o reactie imunologica la anumite proteine din fructe, legume si nuci care se dezvolta la unele persoane cu alergie la polenuri. Simptomele pot ramane cantonate la nivelul cavitatii bucale (prurit, intepaturi, senzatie de contractie a mucoasei jugale, gingivale, palatine si labiale + micropapule si vezicule) sau se pot extinde atat la tegumentele periorale si ale fetei, cat si la nivelul altor organe de soc: tract respirator superior sau inferior, conjunctiva, tract digestiv. In cazuri rare se poate instala chiar soc anafilactic. Este important de mentionat ca reactiile alergice apar in majoritatea cazurilor la ingestia de legume si fructe crude; prelucrarea termica sau conservarea acestora elimina de obicei manifestarile. Antigenele alimentare implicate poseda epitopi prezenti in profiline, comuni cu cei ai unor specii de polen (arbori, graminee, herbacee), astfel ca manifestarile clinice, desi pot aparea ori de cate ori sunt consumate alimentele respective, sunt mult agravate in cursul sezonului polinic. Dintre reprezentantii fructelor distingem: - fructele familiei Rosaceae: mere, caise, piersici, pere, capsuni. Alergia la mere este de obicei asociata cu cea la polenul de mesteacan datorita similitudinii alergenilor; clinic predomina manifestarile oro-faringiene. Mai pot aparea rinita, astma, edem laringian si tulburari gastrointestinale. Piersicile pot induce atat manifestari orale cat si reactii sistemice: urticarie, astm si chiar soc anafilactic. Capsunile constituie o cauza obisnuita de alergie la copii. Printre manifestarile clinice se numara: tulburari gastrointestinale, dermatita atopica, astm, rinita si sindromul alergiei orale. - fructele din familia Betulaceae includ in special alunele de padure care au in componenta lor profiline ce reactioneaza incrucisat cu polenul de mesteacan. Produc de regula sindrom alergic oral, dar sunt posibile si reactii anafilactice severe. - fructele din familia Cucurbitaceae: pepene galben, pepene verde, dovleac. Pepenele galben induce simptome la persoanele sensibilizate, in special la cei cu alergie la latex (sindromul latex-fructe). Sindromul alergiei orale reprezinta cea mai obisnuita manifestare, dar pot aparea si urticarie, tulburari gastrointestinale, dermatita, angioedem si anafilaxie. - kiwi (familia Actinidiaceae) este implicat in special in producerea sindromului alergiei orale; se asociaza adesea cu sensibilizarea fata de mere si alune. Aproximativ 17% dintre pacientii cu alergie la latex prezinta sensibilizare fata de kiwi. - portocalele (familia Rutaceae) consumate ca atare sau sub forma de sucuri proaspete induc frecvent manifestari clinice la persoanele sensibilizate: tulburari gastrointestinale, angioedem, urticarie, rinita, brohospasm, sindromul alergiei orale, anafilaxie. - bananele (familia Musaceae) contin alergeni termostabili ce determina manifestari alergice ca sindromul alergiei orale si rino-conjunctivita, prin sensibilizare incrucisata cu polenul de ambrozie. In plus exista alergie incrucisata intre banane si latex, deci personalul sanitar poate prezenta manifestari anafilactice severe sau simple urticarii de contact, induse de manipularea manusilor chirurgicale dar pregatite de sensibilizarea realizata pe cale orala prin consumul de banane. - ananasul (familia Bromeliaceae) poate determina la persoanele sensibilizate astm, rinita, tulburari gastrointestinale, uneori angioedem sau chiar soc anafilactic. Studiile au confirmat implicarea sa in sindromul latex-fructe. Dintre legumele implicate in reactii alergice mentionam: - legumele familiei Apiaceae: telina si morcovul. Telina poate determina atat manifestari oro-faringiene cat si reactii generalizate: urticarie, astm bronsic sau soc anafilactic. Panalergenul profilina este responsabil de alergia incrucisata cu polenul de mesteacan si pelin. Morcovul prezinta acelasi spectru de reactii ca si telina dar cu o amplitudine mult mai redusa. - legumele familiei Solanaceae: cartofii si rosiile. Cartoful contine alergene volatile capabile sa induca manifestari extradigestive de rino-conjunctivita si astm. Este implicat de asemenea in sindromul alergiei orale, prezentand reactie incrucisata cu polenul de mesteacan. Manifestarile alergice determinate de rosii includ: urticarie-angioedem, dermatita, sindromul alergiei orale, astm, rinita si tulburari gastrointestinale. Prezinta alergie incrucisata cu diverse tipuri de polenuri. - ceapa (familia Alliaceae) induce manifestari de alergie alimentara, astm si rino-conjunctivita la persoanele sensibilizate. De asemenea, au fost descrise cazuri de anafilaxie indusa de efort dupa ingestia de ceapa. O atentie speciala trebuie acordata arahidelor (familia Fabaceae – arahidele apartin legumelor, spre deosebire de nuci si alune de padure ) care se numara printre alimentele cele mai alergizante. Arahidele intra in compozitia unor prajituri, ciocolate, inghetate si bauturi, fiind consumate insa, cel mai frecvent, sub forma lor integrala. Cei doi alergeni majori sunt termostabili si rezistenti la actiunea enzimelor digestive. Declanseaza reactii alergice digestive si extradigestive (astm, rinita, urticarie si eczeme), precum si soc anafilactic. Instalarea manifestarilor clinice se produce rapid (in cateva minute), iar alergenii pot actiona si pe cale inhalatorie (miezul arahidelor). Prezinta reactii alergice incrucisate cu polenul unor graminee (floarea-soarelui).
Citeste mai mult
Pentru a utiliza ghidul de interpretare al analizelor trebuie sa urmati pasii de mai jos.
- Selectati optiunea barbat / femei / copil in functie de persoana care a efectuat analiza;
- Introduceti valoarea din buletinul de analize in prima casuta;
- Selectati unitatea de masura a acesteia din a doua casuta (acolo unde este cazul);
- Apasati butonul "Interpreteaza" pentru a interpreta analiza
Recomandari
Recomandari pentru efectuarea testelor alergologice in vitro:
Determinarile cantitative de IgE specifice reprezinta un instrument pretios pentru:
- diagnostic: confirma sensibilizarea fata de un anumit alergen si permit clinicianului sa identifice alergenii posibil raspunzatori de inflamatia alergica si de simptomele prezentate de pacient;
- prognostic: sensibilizarea precoce poate avea valoare predictiva pentru dezvoltarea in viitor a unei manifestari alergice; s-a demonstrat ca prezenta in primul an de viata de IgE specifice fata de alergeni alimentari se asociaza cu un risc crescut de sensibilizare fata alergeni inhalanti si dezvoltare a unei boli alergice la o varsta mai mare (7-10 ani);
- monitorizare: determinarile de IgE specifice in dinamica pot monitoriza efectele tratamentului (imunoterapie) si pot evidentia schimbarile aparute in timp in statusul alergic al pacientului.
Pregatire pacient
Se recolteaza a jeun (pe nemancate) sau postprandial (dupa mese).
Metoda
Se foloseste metoda imunoenzimatica cu detectie prin fluorescenta (FEIA).
Pentru cadre medicale
Specimen recoltat - sange venos.
Recipient de recoltare - vacutainer fara anticoagulant cu/fara gel separator.
Prelucrare necesara dupa recoltare - se separa serul prin centrifugare.
Volum proba - minim 0.2 mL ser pentru fiecare alergen.
Cauze de respingere a probei - ser hemolizat.
Stabilitate proba - serul separat este stabil 7 zile la 2-8° C; 6 luni la - 20° C.
Limite si interferente
Nu prezinta.