Reactia acid periodic Schiff
Descriere
In celulele sangvine reactia pozitiva este datorata in primul rand prezentei de glicogen citoplasmatic. Acumularea de glicogen se considera a fi un indicator al deregarii metabolismului acestuia. Multe din celulele sangvine prezinta o reactie PAS pozitiva in citoplasma. Intensitatea acestei reactii si tipul de colorare variaza cu tipul celular. Principiul reactiei -reactivul Schiff este o solutie incolora obtinuta prin reducerea fucsinei bazice. Acidul periodic oxideaza grupul glicol sau derivatii sai. Rezultatul este producerea de aldehide care reactioneaza cu reactivul Schiff pentru a produce o culoare purpurie. Glicogenul apare colorat in rosu purpuriu, sub forma de granule sau difuz. Martorul pozitiv al reactiei este reprezentat de granulocitul matur. Granulocitele contin glicogen sub forma difuza incepand cu stadiul de promielocit unde apare roz si creste pe masura maturatiei. Bazofilele sunt moderat-intens PAS pozitive, frecvent prezentand gramezi amorfe in jurul nucleului. In leucemia acuta mieloblastica (LAM) pot exista mieloblasti care prezinta granule rosii, mici sau medii. In faza blastica a leucemiei granulocitare cronice (LGC) blastii sunt frecvent PAS pozitivi, similar limfoblastilor din leucemia acuta limfoblastica. Promielocitele din leucemia acuta promielocitara (LAM-M3), in special forma hipergranulara, sunt de obicei PAS pozitive. In mod normal, un numar mic (mai putin de 15%) de limfocite mature pot fi PAS pozitive cu urmatoarele aspecte : - 1+ rare granule rosii, mici sau medii; - 2+ numar moderat granule rosii, mici sau medii; - 3+ inele de granule rosii, grosolane sau gramezi de materia Citeste mai multPentru a utiliza ghidul de interpretare al analizelor trebuie sa urmati pasii de mai jos.
- Selectati optiunea barbat / femei / copil in functie de persoana care a efectuat analiza;
- Introduceti valoarea din buletinul de analize in prima casuta;
- Selectati unitatea de masura a acesteia din a doua casuta (acolo unde este cazul);
- Apasati butonul "Interpreteaza" pentru a interpreta analiza
Recomandari
Recomandari pentru determinarea PAS:
- diagnosticul leucemiei acute limfoblastice (LAL) subtipurile L1 ºi L2;
- diagnosticul de sindrom mielodisplazic ori LAM-M6 prin evidentierea eritroblastilor PAS-pozitivi;
- diferentierea celulelor Gaucher si a histiocitelor cu granule albastre ca marea de alte tipuri de macrofage.
Pregatire pacient
Se recolteaza a jeun (pe nemancate) sau postprandial (dupa mese).Metoda
Se foloseste examinarea microscopica.Pentru cadre medicale
Specimen recoltat - a) sange capilar si/sau aspirat medular - frotiuri; b) se recomanda recoltarea simultana de sange venos pentru hemograma.
Recipient de recoltare - a) se executa frotiurile de sange capilar direct pe lame de microscopie; b) vacutainer cu EDTA K3 (capac mov), pentru hemograma.
Cantitate recoltata - a) 3-5 frotiuri; b) 2 mL.
Prelucrare necesara dupa recoltare - este preferabil ca fixarea frotiurilor sa se faca in primele 30 minute de la recoltare. Eventual, se poate face in primele 8 ore. Amestec fixator: alcool etilic 9 parti + formol 40% 1 parte. Fixarea se cronometreaza 30 secunde, dupa care frotiurile se spala cu jet de apa de robinet. Frotiurile fixate se pot colora imediat sau se pot pastra cateva zile la temperatura camerei, pana la colorare.
Cauze de respingere a probei - frotiuri nefixate in maxim 8 ore de la recoltare; frotiuri executate din sange recoltat pe EDTA.
Stabilitate proba - frotiurile nefixate sunt stabile maxim 8 ore la 18-30°C; frotiurile fixate sunt stabile 5 zile la temperatura camerei.
Recipient de recoltare - a) se executa frotiurile de sange capilar direct pe lame de microscopie; b) vacutainer cu EDTA K3 (capac mov), pentru hemograma.
Cantitate recoltata - a) 3-5 frotiuri; b) 2 mL.
Prelucrare necesara dupa recoltare - este preferabil ca fixarea frotiurilor sa se faca in primele 30 minute de la recoltare. Eventual, se poate face in primele 8 ore. Amestec fixator: alcool etilic 9 parti + formol 40% 1 parte. Fixarea se cronometreaza 30 secunde, dupa care frotiurile se spala cu jet de apa de robinet. Frotiurile fixate se pot colora imediat sau se pot pastra cateva zile la temperatura camerei, pana la colorare.
Cauze de respingere a probei - frotiuri nefixate in maxim 8 ore de la recoltare; frotiuri executate din sange recoltat pe EDTA.
Stabilitate proba - frotiurile nefixate sunt stabile maxim 8 ore la 18-30°C; frotiurile fixate sunt stabile 5 zile la temperatura camerei.
Limite si interferente
Reactia PAS are valoare mica in diferentierea LAL de alte tipuri de LA cu diagnostic dificil si incert, datorita heterogenitatii limfoblastilor.
